Η μελέτη διαπιστώνει ότι το διαβακενικό οξύ που προέρχεται από τη διατροφή ενισχύει την αντικαρκινική ανοσία

By | November 28, 2023

Σε μια πρόσφατη μελέτη που δημοσιεύθηκε στο Nature, οι ερευνητές ανέπτυξαν μια βιβλιοθήκη θρεπτικών μορίων στο αίμα και τα εξέτασαν για να βρουν διατροφικά συστατικά που επηρεάζουν την αντικαρκινική ανοσία.

Να διαβάσω: Το τρανςβακενικό οξύ επαναπρογραμματίζει το CD8+ Τ κύτταρα και αντικαρκινική ανοσία. Πίστωση εικόνας: Anusorn Nakdee/Shutterstock.com

Κάτω μέρος

Τα διαιτητικά θρεπτικά συστατικά σχετίζονται εγγενώς με τις ανθρώπινες φυσιολογικές διεργασίες, καθώς παρέχουν ενέργεια, βιοσυνθέτουν δομικά στοιχεία και δρουν ως μεσολαβητικές ουσίες.

Ωστόσο, οι μέθοδοι με τις οποίες τα ανθρώπινα θρεπτικά συστατικά που κυκλοφορούν επηρεάζουν συγκεκριμένες φυσιολογικές οδούς είναι ασαφείς, γεγονός που δικαιολογεί περαιτέρω έρευνα.

Σχετικά με τη μελέτη

Στην παρούσα μελέτη, οι ερευνητές διερεύνησαν την επίδραση του διατροφικού οξέος (TVA) στις λειτουργίες των τελεστών κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων και της αντικαρκινικής ανοσίας σε στο Vivo Ρυθμίσεις.

Οι ερευνητές εξέτασαν την επίδραση διαφόρων θρεπτικών ουσιών στα ανθρώπινα Τ λεμφοκύτταρα χρησιμοποιώντας μια τεχνική διαλογής βασισμένη σε βιβλιοθήκη μορίων διατροφής αίματος.

Όλες οι κυτταρικές σειρές (Jurkat T, ανθρώπινο Plat-E, καρκινικά κύτταρα μελανώματος ποντικού B16-OVA, καρκινικά κύτταρα μελανώματος ποντικού B16F10, καρκινικά κύτταρα μαστού E0771 και κύτταρα καρκινώματος πνεύμονα Lewis LLC1 και κύτταρα αδενοκαρκινώματος παχέος εντέρου ποντικού MC38) επικυρώθηκαν χρησιμοποιώντας βραχύ γονιδιωματικό κύτταρο δημιουργία προφίλ διαδοχικής επανάληψης (STR).

Ο πρώτος έλεγχος χρησιμοποιήθηκε για τον εντοπισμό τροφών που προάγουν την ενεργοποίηση των λεμφοκυττάρων Τ Jurkat που προκαλείται από τη συστάδα διαφοροποίησης 23 (CD23) και τα αντισώματα CD28. Η οθόνη 1b εντόπισε θρεπτικά συστατικά που αντιστρέφουν την εξαρτώμενη από τον προγραμματισμένο συνδέτη θανάτου 1 (PD-L1) εξάντληση των Jurkat Τ κυττάρων που εκφράζουν σταθερά την πρωτεΐνη προγραμματισμένου κυτταρικού θανάτου 1 (PD-1) που παράγεται από ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα πνεύμονα H596 που εκφράζουν συγκαλλιέργεια PD-L1 .

Η ομάδα πραγματοποίησε καθαρισμό με μαγνητικά σφαιρίδια για να αναγνωρίσει κύτταρα OT-I που εκφράζουν την πρωτεΐνη 9 (Cas9) που σχετίζεται με CRISPR από τον σπλήνα και τους περιφερειακούς λεμφαδένες ζώων Cas9-OT-I.

Οι εμπορικοί λήπτες θεραπείας με χιμαιρικό υποδοχέα αντιγόνου (CAR) Τ λεμφοκυττάρων παρείχαν δείγματα ορού. Οι ερευνητές μόλυναν τα λεμφοκύτταρα Jurkat Τ με έναν προκατασκευασμένο φακοϊό που εκφράζει το PD-1 και στη συνέχεια επέλεξαν 2,0 g/mL πουρομυκίνης για να παράγουν λεμφοκύτταρα Jurkat T που εκφράζουν PD-1.

Το Western blotting αποκάλυψε την παρουσία PD-1. Η μελέτη περιελάμβανε τροφοδοσία λεμφοκυττάρων Τ Jurkat με μια διατροφική βιβλιοθήκη για δύο ημέρες και στη συνέχεια διέγερσή τους με αντισώματα αντι-CD3 και αντι-CD28 για 12 ώρες. Τα επίπεδα ιντερλευκίνης-2 (IL-2) μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας ενζυμικά συνδεδεμένες ανοσοπροσροφητικές δοκιμασίες (ELISA).

Στη δεύτερη διαλογή, τα λεμφοκύτταρα Jurkat Τ συγκαλλιεργήθηκαν με κύτταρα που εκφράζουν PD-1 για 60 ώρες και στη συνέχεια διεγέρθηκαν με αντισώματα αντι-CD23 και αντι-CD28 για 12 ώρες. Τα ζώα ποντικού Gpr43fl/fl, Gpr43-/- και Cd8acre εκτράφηκαν για να παράγουν ποντίκια νοκ-άουτ υπό όρους Gpr43-/flCd8acre (Gpr43/flCd8acre) και να αναπτύξουν το μοντέλο όγκου Gpr43/ζώου.

Η ομάδα έλαβε αιμορραγίες στα μάγουλα τις ημέρες 3.0, 12 και 18 και πραγματοποίησε κυτταρομετρία ροής για να αξιολογήσει την αποτελεσματικότητα της μείωσης των CD8+ Τ κυττάρων χρησιμοποιώντας αντισώματα που στοχεύουν μη ανταγωνιστικούς επιτόπους CD8 (BV711 ποντικού αντι-CD8).

In vitro [13C] παρακολούθηση λιπαρών οξέων, δοκιμασία οξείδωσης λιπαρών οξέων ιππόκαμπος, μετρημένο επίπεδο ασβεστίου (Ca2+) κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων (CD8+), ομαδοποιημένες τακτικά διακεκομμένες σύντομες παλινδρομικές επαναλήψεις (CRISPR) επεξεργασία των κυττάρων OT-I ποντικού, ανάλυση pull-down για ταυτοποίηση διασταυρούμενης σύνδεσης Πραγματοποιήθηκαν συμπλέγματα πρωτεϊνών-TVA, προσδιορισμός συγκαλλιέργειας Blinatumomab και προσδιορισμός επέκτασης κυττάρων CAR-T. Τα επίπεδα TVA ποσοτικοποιήθηκαν με φασματοσκοπία πυρηνικού μαγνητικού συντονισμού (NMR).

Αποτελέσματα

Το TVA, ένα συστατικό trans λιπαρών οξέων του ανθρώπινου γάλακτος, προέρχεται κυρίως από τροφές μηρυκαστικών όπως το αρνί, το βόειο κρέας και τα γαλακτοκομικά προϊόντα. Οι άνθρωποι και τα ποντίκια μετατρέπουν μόνο το 12% έως 19% της διαιτητικής TVA σε ρουμενικό οξύ. Το TVA ανέστειλε τον ανοσορυθμιστικό συζευγμένο με πρωτεΐνη G υποδοχέα 43 (GPR43), ένα μόριο που διεγείρεται από τους συνδέτες του SCFA.

Το TVA πυροδότησε τον άξονα κυκλικής απόκρισης AMP πρωτεΐνης (cAMP)-πρωτεϊνικής κινάσης Α (PKA) (CREB), βελτιώνοντας τη λειτουργία των κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων, υποδεικνύοντας ότι η διαιτητική TVA αντί της εντερικής μικροχλωρίδας SCFA που προέρχεται από φυτά, είναι ξενιστής εξωγενής οδός επαναπρογραμματισμού για κυτταροτοξικά Τ λεμφοκύτταρα.

Το TVA εξασθένησε τη δραστηριότητα σύζευξης Gαi του GPR43 και αύξησε τα επίπεδα cAMP, ανταγωνίζοντας την επίδραση των μορίων λιπαρών οξέων βραχείας αλυσίδας στο κυκλικό AMP για την ενίσχυση της λειτουργίας των κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων τύπου τελεστή. Το TVA προήγαγε την αντικαρκινική ανοσία μέσω της ρύθμισης των CD8+ Τ λεμφοκυττάρων, αυξάνοντας επιλεκτικά τη λειτουργία των διεγερμένων κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων.

Η αύξηση της λειτουργίας των κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων που προκαλείται από το TVA ρυθμίστηκε από την οδό GPCR-CREB, με θετική ανάδραση που αυξάνει την έκφραση PKA και CREB σε επίπεδο γονιδίου. Η δραστηριότητα του TVA απαιτεί CREB και θα μπορούσε να βελτιώσει τη λειτουργία των κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων και την αντικαρκινική ανοσία στο Vivo. Η αναστολή CREB ανταγωνίστηκε τον αντίκτυπο της διατροφικής TVA στην αντικαρκινική ανοσία.

Το TVA έχει βελτιώσει τις θεραπείες που βασίζονται σε κύτταρα Τ. Για τα κυτταροτοξικά λεμφοκύτταρα Τ, η οδός GPR43-CREB μπορεί να είναι ειδική για τον κυτταρικό τύπο. Η θεραπεία με TVA, για παράδειγμα, βελτίωσε τη σύνθεση της ιντερλευκίνης-2 από τα βοηθητικά λεμφοκύτταρα Τ (CD4+), αλλά δεν είχε καμία επίδραση στη δημιουργία μορίων τελεστών, όπως ο παράγοντας νέκρωσης όγκου άλφα (TNF-α) και η ιντερφερόνη γάμμα (IFN-γ). ) ή τον πολλαπλασιασμό ή την απόπτωση των βοηθητικών Τ λεμφοκυττάρων.

Ως εκ τούτου, οι επιδράσεις της διατροφικής TVA στα βοηθητικά Τ λεμφοκύτταρα ήταν ελάχιστες σε σύγκριση με εκείνες στα κυτταροτοξικά Τ λεμφοκύτταρα, κάτι που μπορεί να οφείλεται στη χαμηλή έκφραση του GPR43 στα βοηθητικά Τ λεμφοκύτταρα.

συμπέρασμα

Συνολικά, τα αποτελέσματα της μελέτης έδειξαν ότι το διαιτητικό τρανςβακενικό οξύ αυξάνει τη δραστηριότητα των τελεστών κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων και την αντικαρκινική ανοσία στο στο Vivo Ρυθμίσεις.

Η εξωοργανιστική TVA, σε αντίθεση με τα ενδοοργανιστικά SCFA που προέρχονται από μικρόβια του εντέρου, που λειτουργούν ως αγωνιστές GPR43, επαναπρογραμμάτισε τα CD8+ Τ λεμφοκύτταρα μέσω εξωγενούς ρύθμισης για να απενεργοποιήσει το GPR43.

Τα αποτελέσματα της μελέτης συμβάλλουν στην καλύτερη κατανόηση των μοριακών δεσμών μεταξύ της διατροφής και της ανθρώπινης παθοφυσιολογίας, με επιπτώσεις για μελλοντική έρευνα σχετικά με το ρόλο των κυκλοφορούντων θρεπτικών ουσιών στην υγεία και τις ασθένειες.

Απαιτείται περαιτέρω έρευνα για τη βελτίωση της κατανόησης των οδών τελεστών κατάντη του GPR43 και για την αποσαφήνιση των υποκείμενων διεργασιών.

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *